Le Big Sister non sono nient'altro che Little Sister cresciute, e con un rapporto particolare con l'ADAM.
Rispetto alla maggior parte delle persone che usano i plasmidi sono molto più potenti; indossano armature simili a quelle dei Big Daddy ma sono molto più agili e pericolose. Il loro scopo originario era quello di garantire l'equilibrio ecologico di Rapture, ma come la maggior parte degli esperimenti avvenuti in questa utopica città sottomarina le cose sono andate male, e si sono trasformate in creature assetate di sangue. Le Big Sister sono talmente pericolose da essere le uniche in grado di distruggere il vetro che protegge la città dall'acqua. Prestate molta attenzione durante i vostri incontri con questi essere infernali, altrimenti diventerete solo carne da macello.